色谱柱重要参数 色谱柱各参数有什么意义

一、色谱柱各参数有什么意义

意义：聚合物基质多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化学稳定，应用pH范围宽，具有更强的疏水性，对蛋白质等样品分离效果较好;但强度较小，有机溶剂可能导致聚合物溶胀而受损，批次重复性较差，商品化色谱柱不多，一般价格较贵。

一、液相色谱柱物理性质参数

1、柱长，内径

如250*4.6mm。一般柱长在2—250mm，柱越长，分离度越高，但柱压更高，分离所需时间更长;但分离度与理论塔板数的平方根成正比，所以一昧增加柱长并不是最有效的分离手段，一般情况下，150mm、5um的填料可以提供足够的塔板数。

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2、粒径

粒径影响色谱分离度。粒径越小，分离越快，柱效越高，但柱压力越高，柱容易被污染，导致柱寿命降低。常见分析柱通常使用5um填料，复杂的多组分样品分离一般使用3.5um粒径，更大内径的制备色谱柱通常使用更大的粒径。如果固定相选择是正确，但是分离度不够，那么选用更小的粒度的填料是很有用的。3.5um填料填充柱的柱效比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%;然而，3.5um的色谱柱的背压却是5um的2倍，因此如何选择填料粒径需要根据现实情况而定。

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3、孔径

孔径，60A，120A，300A等。孔径小，则含孔率高，比表面积大，载碳量高;色谱柱填料孔径大小需和分子大小相匹配，保证分子自由进出填料孔并与孔内表面的键合相进行分离分配，通常要求孔径直径是分子直径的3倍以上，一般小分子使用80—120A，大分子使用300A。

二、描述色谱峰的参数有哪些有什么意义

描述色谱峰的参数

1，保留时间，色谱峰是关于保留时间的特征峰。在同一条件下，不同保留时间的色谱峰代表不同物质。

2，峰面积，同一物质的浓度和峰面积是成正比的。所以峰面积是计算物质浓度的必要参数。

其他的参数不是必要参数，比如分离度，表示该色谱峰和之前色谱峰是否完全分开。理论塔板数，表示该色谱峰的峰型是否良好等等。

待测组分由色谱柱流出的后通过检测器系统时所产生的响应信号和微分曲线称为色谱峰,或简称峰.

拖尾因子(tailing factor,T)——T＝,用以衡量色谱峰的对称性.也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor).《中国药典》规定T应为0.95~1.05.T＜0.95为前延峰,T＞1.05为拖尾峰.

峰底——基线上峰的起点至终点的距离.

峰高(peak height,h)——峰的最高点至峰底的距离.

峰宽(peak width,W)——峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离.W＝4σ

半峰宽(peak width at half-height,Wh/2)——峰高一半处的峰宽.Wh/2＝2.355σ

标准偏差(standard deviation,σ)——正态分布曲线x＝±1时（拐点）的峰宽之半.正常峰的拐点在峰高的0.607倍处.标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度.σ小,分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高；反之,σ大,峰形胖、柱效低.

峰面积(peak area,A)——峰与峰底所包围的面积.A＝×σ×h＝2.507σ h＝1.064 Wh/2 h

其中拖尾因子和半峰宽是比较重要的参数。

三、液相色谱C18色谱柱特点及相关参数

GP-C18 Bio-C18 Amethyst(紫晶)色谱柱-美国赛分-sepax-北京康农兴牧

常规用途分析型液相色谱柱>>反相液相色谱柱（RPLC）介绍：

GP-C18色谱柱(GP-C8,GP-C4详见产品手册)•方法开发的首选柱，

•高度可控的单分子层形成和封尾技术

•高的柱间重现性

•高的选择性和分离效率

•适合分离酸性、中性和碱性化合物，以及许多药物、多肽等

•推荐使用有机溶剂或有机溶剂/水体系的流动相

可替代Symmetry C18、LunaTMC18、Symmetry Shield RP18、LunaTMDiscoveryTMC18、Zorbax Eclipse XDB C18、Inertsil ODS-2 ODS-3、SupelcosilTMLC-18-DB、Kromasil C18、lTSKgel ODS-100Z

GP-C18以全覆盖的键合硅胶为填料，具有优异的稳定性。独特的单官能团化学键合技术可避免形成复合的C18分子层。均匀的涂层确保了固定相具有高选择性和高效率的分离特点。

GP-C18填料技术参数

硅胶：球形,高纯度(<10ppm金属杂质)

孔径：120Å

粒径：1.8、2.2、3、4、5、7和10µm

孔体积：1.0mL/g

比表面积：300m²/g

固定相结构：单层全封尾

碳载量：17%

PH值范围：2-11

HP-C18色谱柱

•可使用100%的水相做流动相

•高度可控的单分子层形成和封尾技术

•高的柱间重现性

•高的选择性和分离效率

•适合分离酸性、中性和碱性化合物，以及许多药物、多肽等

可替代AquasilC18、ArlantisTM、Zorbax SB-Aq SynergiHydro-RP、HydroBondPS C18、HydroBond AQ、UltraAqueous C18、ProntoSIL C18 AQ、YMC-Pack ODS-AQ、EliteSino ChromODSBP TSKgelODS100V HP-C18填料技术参数

硅胶：球形,高纯度(<10ppm金属杂质)

孔径：120Å/ 200Å（用于大分子）

粒径：3、4、5、7、10µm/ 3、5、10µm

孔体积：1.0mL/g

比表面积：300m²/g/200m²/g

固定相结构：单层全封尾

碳载量：17%/ 10%

PH值范围：2.0-9.0

BR-C18色谱柱

•高度可控的单分子层形成和封尾技术

•高的柱间重现性

•高的选择性和分离效率

•宽的pH适用范围1.5-10.5

•适合分离酸性、中性和碱性化合物，以及许多多肽和蛋白等

可替代Zorbax Extend C18 Vydac218TP C18;;Jupite300 C18 BR-C18填料技术参数

硅胶：球形，高纯度(<10ppm金属杂质)

孔径：120Å

粒径：3、5和10µm

孔体积：1.0mL/g

比表面积：350m²/g

固定相结构：单层全封尾

碳载量：19.5%

PH值范围：1.5-10.5

Bio-C18色谱柱

Bio-C18填料有200和300Å两种孔径规格，适合于肽段的指纹图谱识别，天然和人工合成多肽以及低分子量蛋白等的分离。所采用的化学键合技术可以确保ODS单分子层不会在纯水溶液中发生塌陷。

•高度可控的单分子层形成和封尾技术

•高的柱间重现性

•高的选择性和分离效率

•可使用纯水作为流动相

•适合分离多肽、蛋白以及许多药物等

可替代XterraC18;XbridgeC18 Bio-C18填料技术参数

硅胶：球形,高纯度(<10ppm金属杂质)

孔径：200Å/ 300Å

粒径：3、4、5和10µm/ 3和5µm

孔体积：1.0mL/g/ 0.95mL/g

比表面积：200m²/g/ 105m²/g

固定相结构：单层全封尾

碳载量：10%/ 7%

PH值范围：2.0-9.0

Amethyst(紫晶) P分析型液相色谱柱

通用型C18，推荐中药分离选择此柱。

•采用高度可控的单官能团键合和封尾技术

•高的柱间重现性

•高的选择性和分离效率

•可在pH 1.5-9.0范围内使用

•适合分离许多药物分子以及多肽等

•可用100%水作为流动相

Amethyst C18-P填料技术参数

硅胶：球形,高纯度(金属杂质<10ppm)

孔径：120Å

粒径：3、5和10µm

孔体积：1.0mL/g

比表面积：300m²/g

固定相结构：单官能团全封尾

碳载量：20.0%

pH值范围： 1.5-9.0

Amethyst(紫晶) H分析型液相色谱柱

Amethyst C18-H一般用途C18，推荐西药如抗生素药的分离选择此柱。

•采用高度可控的单分子层形成和封尾技术

•高的柱间重现性

•高的选择性和分离效率

•最高可耐受pH值至11

•可在pH 1.5-10..5范围内使用

•适合分离酸性、中性和碱性化合物，以及多肽和蛋白等 Amethyst C18-H填料技术参数

硅胶：球形,高纯度(金属杂质<10ppm)

孔径：120Å

粒径：3、5和10µm

孔体积：1.0mL/g

比表面积：350m²/g

固定相结构：三官能团单分子层全封尾

碳载量：19.0%

pH值范围： 1.5-10.5

Sapphire(宝石)分析型液相色谱柱

Sapphire C18复杂样品的分离

•采用高度可控的单分子层形成和封尾技术

•高的柱间重现性

•对疏水和亲水化合物都具有高选择性和分离效率

•与其它C18填料相比具有更大的比表面积，更长的样品保留时间，以及更高的上样量

•特为碱性化合物如胺类等的分离而设计

•可用纯水作为流动相

•适合分离酸性、中性和碱性化合物，以及许多药物分子和多肽等 Sapphire C18填料技术参数

硅胶：球形,高纯度(金属杂质<10ppm)

孔径：100Å

粒径：3、5和10µm

孔体积：1.05mL/g

比表面积：450m²/g

固定相结构：单官能团全封尾

碳载量：17.0%

pH值范围： 1.5-9.0

体积排阻柱 SRT-SEC SRT-SEC可完全替代TSK凝胶柱。

SRT SEC固定相是以高纯度具有良好机械稳定性的硅胶为基质，表面化学键合有一层均一、亲水、纳米厚度的中性聚合物薄膜。该固定相的合成采用赛分公司独有的表面化学键合技术，可确保柱与柱之间的高度重现性。SRT SEC固定相具有高的化学和机械稳定性，与生物分子等之间的非特异性相互作用也很小。孔径规格有100、150、300、500、1000和2000Å，可确保高分离容量分辨率

Nanofilm-SEC Nanofilm-SEC针对柱容性蛋白，解决TSK寿命问题的色谱柱，使用寿命更长。

Nanofilm SEC固定相是以高纯度具有良好机械稳定性的硅胶为基质，表面化学键合有一层均一、亲水、纳米厚度的中性聚合物薄膜。该固定相的一个特点是可使用低盐浓度，或含有机溶剂的缓冲液作为流动相进行生物样品的分离，并具有高的分辨率和样品回收率。该色谱填料为窄粒径分布的球形硅胶颗粒。孔径规格有150、250、450和950Å。

离子交换柱硅胶基质 HP-SCX推荐用于盐酸二甲双胍的分析新康泰克药物的分析

HP-SAX推荐用于核苷类物质的分析草柑膦的分析

聚合物基质 Proteomix离子交换色谱柱

推荐用于蛋白质、低聚核苷酸和多肽的分离而设计，具有高分辨率、高效率和高回收率的特点。

Sepax首创1μm颗粒制造技术。专利技术的表面修饰，不但消除固定相与提高了生物分子之间的非特异性互相作用同时有效的无孔填料的吸附容量，从而使色谱柱在应用中具有极高的柱效和回收率